Caracterització de determinants estructurals de propietats especials de la ribonucleasa pancreàtica humana

Abstract

Ribonucleases are promising candidates for use in anticancer therapy. There are different ways to endow an RNase with antitumor properties. Targeting the enzyme to the cell nucleus is a potential approach. PE5 is a variant of HP-RNase that it’s cytotoxic because it contains a nuclear localization signal. It has been shown that this sequence allows its interaction with α-importin. An alternative strategy to endow an RNase with cytotoxic activity is its dimerization. An HP-RNase variant, PM8, which forms a dimer through domain swapping, was produced in solution. This variant dimerized through a two-steps mechanism of domain swapping. To prove his model several variants of PM8 were produced in which the side chains of residues involved were removed. The variation of flexibility of the resulting hinge peptides and the effect of these changes on the ability of the variants to swap domains and to dimerize was determined

Les ribonucleases són potencials agents anticancerosos. Hi ha diferents camins per aconseguir que una RNasa adquireixi propietats antitumorals. La direccionalització al nucli de la cèl•lula és una opció potencial. PE5 és una variant de l’HP-RNasa que és citotòxica perquè conté una seqüència de localització nuclear. Es demostra que aquesta seqüència permet la interacció de PE5 amb la importina-α. Una estratègia alternativa per dotar una RNasa d’activitat citotòxica és l’adquisició d’estructura quaternària. Es va obtenir en solució una variant de l’HP-RNasa, PM8, la qual forma un dímer per intercanvi de dominis. Aquesta variant dimeritza a través d’un mecanisme en dues etapes. Per comprovar aquest model se’n van obtenir variants en les quals es van eliminar cadenes laterals de residus implicats. Es va determinar el canvi de flexibilitat dels pèptids xarnera resultants, així com l’efecte dels canvis en la capacitat de les variants per dimeritzar i intercanviar els dominis